Abstract Two allopatric populations of Brazilian diploid and tetraploid Odontophrynus americanus species complex, both from São Paulo state, had their blood hemoglobin biochemically analyzed. In addition, these specimens were cytogenetically characterized. Biochemical characterization of hemoglobin expression showed a distinct banding pattern between the allopatric specimens. Besides this, two distinct phenotypes, not linked to ploidy, sex, or age, were observed in adult animals of both populations. Phenotype A exhibits dark-colored body with small papillae, ogival-shaped jaw with reduced interpupillary distance and shorter hind limbs. Phenotype B shows yellowish-colored body with larger papillae, arch-shaped jaw with broader interpupillary distance and longer hind limbs. Intermediate phenotypes were also found. Considering the geographical isolation of both populations, differences in chromosomal secondary constrictions and distinct hemoglobins banding patterns, these data indicate that 2n and 4n populations represent cryptic species in the O. americanus species complex. The observed phenotypic diversity can be interpreted as population genetic variability. Eventually future data may indicate a probable beginning of speciation in these Brazilian frogs. Such inter- and intrapopulational differentiation/speciation process indicates that O. americanus species complex taxonomy deserves further evaluation by genomics and metabarcoding communities, also considering the pattern of hemoglobin expression, in South American frogs.

Filamentos ligados a poros foram visualizados em núcleos de espermatócitos de anuros através da técnica de espalhamento para microscopia eletrônica de transmissão. Os animais usados pertencem ao gênero Odontophrynus com espécies cripticas diplo e tetraplóides naturais, tendo os tetraplóides atividade metabólica reduzida. Os filamentos com 20-40 nm de largura são ligados a um anel componente do complexo poro nuclear de 90-120 nm e estendem-se até 1 µm (ou mais) para dentro do núcleo. Os filamentos são curvos e ligam poros simples ou poros vizinhos. Os filamentos intranucleares são associados a fibras de cromatina e relacionados a partículas de RNP de 20-25 nm e a estruturas esféricas de 0.5µm, com variações. Os agregados de poros vizinhos com os filamentos longos são mais freqüentemente observados em núcleos 4n. Concluímos que os filamentos intranucleares podem corresponder aos emaranhados fibrilares descritos em núcleos de oócitos de Xenopus e possivelmente relacion ados ao transporte de RNA. A base molecular desse RNA não é conhecida. Contudo, os aspectos morfológicos das estruturas esféricas parecem indicar que elas podem corresponder à cromatina nucleolar ou a estruturas derivadas do nucléolo. Também, especulamos se os agregados complexos de poros vizinhos com os filamentos intranucleares podem corresponder aos aglomerados de poros previamente descritos nesses animais tetraplóides através da técnica''freeze-etching''.

Pore-linked filaments were visualized in spreads of anuran spermatocyte nuclei using transmission electron microscope. We used Odontophrynus diplo and tetraploid species having the tetraploid frogs reduced metabolic activities. The filaments with 20-40 nm width are connected to a ring component of the nuclear pore complex with 90-120 nm and extend up to 1µm (or more) into the nucleus. The filaments are curved and connect single or neighboring pores. The intranuclear filaments are associated with chromatin fibers and related to RNP particles of 20-25 nm and spheroidal structures of 0.5µm, with variations. The aggregates of several neighboring pores with the filaments are more commonly observed in 4n nuclei. We concluded that the intranuclear filaments may correspond to the fibrillar network described in Xenopus oocyte nucleus being probably related to RNA transport. The molecular basis of this RNA remains elusive. Nevertheless, the morphological aspects of the spheroidal structures indicate they could correspond to nucleolar chromatin or to nucleolus-derived structures. We also speculate whether the complex aggregates of neighboring pores with intranuclear filaments may correspond to pore clustering previously described in these tetraploid animals using freeze-etching experiments.

O posicionamento dos macrocromossomos de Bothrops jararaca e Bothrops insularis (Viperidae) foi estudado em metáfases radiais não alteradas de células não cultivadas (espermatogônias e oogônias) não submetidas a inibidores do fuso. Metáfases colchicinizadas de tecidos não cultivados (baço e intestino) e cultivados (sangue) foram também analisadas. Relatamos dois arranjos cromossômicos antagônicos não casuais em células premeióticas não tratadas: a configuração paralela, com cromossomos homólogos associados lado a lado na placa metafásica, e a configuração antiparalela, tendo os cromossomos homólogos com distribuição antipolar no anel metafásico. O aspecto antiparalelo apareceu também em células colchicinizadas. O arranjo espacial dos cromossomos em ambas configurações é grupal, dependente do tamanho e mantido na meiose. Descrevemos também endomitoses seguidas de mitoses reducionais que restabelecem o número diplóide em gônias não tratadas. Em machos de B. jararaca observamos alterações no mecanismo meiótico em algumas regiões da gônada. Neste caso, as células endoreduplicadas segregam os diplocromossomos para polos opostos, formando diretamente metáfases da segunda divisão da meiose com supressão da primeira divisão. Numa divisão sucessiva, estas metáfases formam núcleos com um conjunto de cromossomos. Duplicação cromossômica em oogônias é conhecida em espécies híbridas e em salamandras e lagartos partenogenéticos. Bothrops jararaca também apresentou rearranjos cromossômicos, ocasionando aneuploidias na mitose e meiose. Sugerimos que o pareamento somático, a endomitose, as alterações da meiose e as aberrações cromossômicas podem ser processos correlacionados. Aspectos similares de configurações nucleares, endomitose e mitose reducional foram encontrados em outras espécies de Viperidae e Colubridae.

The positioning of macrochromosomes of Bothrops jararaca and Bothrops insularis (Viperidae) was studied in undistorted radial metaphases of uncultured cells (spermatogonia and oogonia) not subjected to spindle inhibitors. Colchicinized metaphases from uncultured (spleen and intestine) and cultured tissues (blood) were also analyzed. We report two antagonic non-random chromosome arrangements in untreated premeiotic cells: the parallel configuration with homologue chromosomes associated side by side in the metaphase plate and the antiparallel configuration having homologue chromosomes with antipolar distribution in the metaphase ring. The antiparallel aspect also appeared in colchicinized cells. The spatial chromosome arrangement in both configurations is groupal size-dependent and maintained through meiosis. We also describe, in untreated gonia cells, endomitosis followed by reductional mitosis which restores the diploid number. In B. jararaca males we observed that some gonad regions present changes in the meiotic mechanism. In this case, endoreduplicated cells segregate the diplochromosomes to opposite poles forming directly endoreduplicated second metaphases of meiosis with the suppression of first meiosis. By a successive division, these cells form nuclei with one set of chromosomes. Chromosome doubling in oogonia is known in hybrid species and in parthenogenetic salamanders and lizards. This species also presented chromosome rearrangements leading to aneuploidies in mitosis and meiosis. It is suggested that somatic pairing, endomitosis, meiotic alterations, and chromosomal aberrations can be correlated processes. Similar aspects of nuclei configurations, endomitosis and reductional mitosis were found in other Viperidae and Colubridae species.

É relatada a presença de uma translocação 21-13/15 nos cariótipos com 46 cromossomos de um menino mongolóide (síndrome de Down), sendo o cromossomo anômalo transmitido pela mãe do paciente. São discutidas a possível deficiência do cromossomo 21 translocado, e a possivel origem da anomalia na família. É assinalada a presença de um cromossomo Y mar-cadamente grande, tanto nos cariótipos do paciente como nos do seu pai.

The presence of a translocation 21/13-15 is related in 46 chromosomes, karyotypes of a mongoloid male child (Down's syndrome). The abnormal chromosome was transmitted by the mother of the patient. The possible deficiency of translocated chromosome 21 and the possible origin of the anomaly in the family was discussed and the presence of a markedly large Y chromosome in the karyotypes of the patient as in those of his father was also noted.